A pesar de tratarse de una de las especies más grandes del género Myotis y de tener una distribución amplia en Norteamérica, sabemos relativamente poco de Myotis volans. Hay cuatro subespecies, dos de las cuales (M. volans amotus y M. volans volans) habitan sólo en México. Su dieta está compuesta principalmente por insectos voladores (hasta 75% de polillas), que detectan al vuelo desde distancias de hasta 10 m. En invierno forman colonias de hibernación en cuevas, por lo que esta especie puede estar en riesgo ante el avance del síndrome de la nariz blanca en Estados Unidos y Canadá.